やぶにらみ生物論７１： 解糖

１７世紀の英国の化学者ジョン（ヨハネス）・メイヨー（１６４０～１６７９、図１）は、密閉容器にねずみとろうそくを入れ、ろうそくを燃やすと、まずろうそくが消えて、そのあとねずみが死ぬことを発見しました。ろうそくを燃やさないと、ねずみは燃やしたときと比べてもっと永く生きられました。

ボイルがすでに燃焼には空気が必要であることを主張していましたが、メイヨーは燃焼および生命現象には、空気の成分の１部だけが必要であるとし、その要素を酸素と命名しました。彼は肺が空気から酸素をより分けて血液に供給していると考え、さらに筋肉の活動も体温維持も酸素の燃焼によって行われていると考えていました（１）。メイヨーの慧眼には恐るべきものがあります。

メイヨーの学説はほぼ１００年後に、ジョゼフ・プリーストリーとアントワーヌ・ラボアジェ（１７４３～１７９４、図１）によって再発見され、特にラボアジェは当時流布していたフロギストン説（「燃焼」はフロギストンという物質の放出の過程である）を否定し、物質と酸素が結合することが燃焼の本質であることを証明しました。彼はこのことを契機に質量保存の法則をみつけました。

ラボアジェはメイヨーの考えを正しく引き継ぎ、生命の本質とは、呼吸によって体内に取り込まれた酸素によって、体内の物質を燃焼させることであると考えました。彼の著書 "Elements of Chemistry" は英文版もあり、無料でダウンロードして読むことができます（２）。業績をわかりやすくまとめたサイトもあります（３）。

彼は炭の燃焼を研究し、その本質が炭素と酸素の結合によって二酸化炭素が発生することであることを発見しました。さらに人間の呼吸もこれと類似した現象で、体内にとりこまれた酸素が、体内の炭素と結合して炭酸になることであるとしました。図２はラボアジェと共同研究者達が人の吐く息を集めて、成分を分析する実験を行っているところです。一番右でノートをとっているのが彼の妻マリー・アンヌで、彼女は実験ノートをとるだけでなく、実験器具や実験を実施している状況を正確に絵に描いたり、実験の手伝いや英語の論文の翻訳など八面六臂の大活躍で、世界最初の女性科学者とされています（４）。

ラボアジェは徴税請負人の仕事で研究費を稼いでいました。この仕事は当然恨みを買う仕事であり、フランス革命において断罪され処刑される結果となりました。彼の名はもちろんエッフェル塔に刻まれています。

さて、ではラボアジェの酸素と結合して燃焼する生体物質とは何なのでしょうか？　この答えを得るために大きな貢献をしたのがクロード・ベルナール（１８１３～１８７８、図３）でした。彼はエネルギー源となる物質はブドウ糖であること、ブドウ糖はグリコゲンという形で肝臓に貯蔵され、グリコゲンは必要時にブドウ糖に分解されることなどを証明しました。このほかにも膵液がタンパク質や多糖類を消化する、胆汁は脂質の消化を助ける、など栄養学の基盤となるような現象を次々と解明しました（５）。ただベルナールの時代には実験動物の取り扱いが悲惨なものだったので、彼の家族は動物実験に反対してみんな出て行ってしまいました（３）。国葬までされた偉大な科学者でしたが、プライベートは寂しい人生だったようです。

クロード・ベルナールは科学哲学者でもあり、松岡正剛がまとめた彼の言葉（６）から少し引用してみました。

●　実験は客観と主観のあいだの唯一の仲介者である。
●　実験的方法とは、精神と思想の自由を宣言する科学的方法である。
●　われわれは疑念をおこすべきなのであって、懐疑的であってはならない。
●　実験的見解は完成した科学の最終仕上げである。

ベルナールの「実験医学序説」は私も学生時代に読んだ記憶があります。現在も岩波文庫で出版されているようです（７、図３）。

エネルギー源がブドウ糖であることがわかったので、次はブドウ糖がどのように代謝されてエネルギーが生み出されるのかという問題でした。この問題を解明したのはグスタフ・エムデン（１８７４～１９３３、図４）とオットー・マイヤーホフ（１８８４～１９５１、図４）でした。

エムデンとマイヤーホフは共にユダヤ人だったので、ヒトラーが台頭してからは悲惨な人生でした。エムデンはヒトラー・ユーゲントの乱入で講義を妨害され、自宅に引きこもって失意のうちに病死、マイヤーホフはフランスからピレネー山脈を越えてスペインに逃れ、さらにアメリカに亡命しました。このあたりの事情は木村光が詳細を記述しています（８）。彼の文章を読むと、マイヤーホフがアメリカに亡命できたのはまさに奇跡であったことがわかります。

エムデンとマイヤーホフと彼らの協力者達が解明したブドウ糖からピルビン酸への代謝経路を図５に示します。現代的知見では、この経路で１分子のブドウ糖の代謝によって４分子のＡＴＰが生成され、２分子のＡＴＰが消費されます。またＮＡＤＨが２分子生成されます。図５で計算が合わないと思われる方もおられるかもしれませんが、グルコース１分子からグリセルアルデヒド－３－リン酸２分子が生成されるので計算は合っています。この代謝経路は解糖におけるエムデン－マイヤーホフ経路と呼ばれています。エムデンとマイヤーホフはまさしくライバルであり、非常に仲が悪かったようです。

エムデン－マイヤーホフ経路は、多少のバリエーションはありますが、細菌・古細菌・真核生物のドメインを問わない共通の代謝経路です。酸素がなくてもＡＴＰを産生できるので、地球の大気に酸素がなかった時代から完成していたと思われます。地球の生物がひとつのファミリーであることの証左でもあります。

拡大図↓

エムデン－マイヤーホフ経路の解明だけでは、もちろんラボアジェの「酸素と結合して燃焼する生体物質」は明らかになっていません。ラボアジェに答えるためには、ＡＴＰ（アデノシン３リン酸）の発見と機能の解明、およびミトコンドリアにおけるクエン酸回路と電子伝達系の解明が必要でした。しかしそれもこれもエムデンとマイヤーホフが解明した解糖系でピルビン酸が生成されるということが出発点になっています。

ＡＴＰを誰が発見したのかということについては杉晴夫が詳しい調査を行っています（４）。彼の結論によると、「ＡＴＰ (アデノシン３リン酸) の発見者はカール・ローマンということになっており、論文出版も１ヶ月早かったのですが、これはフィスケの研究室をマイヤーホフが訪問したときに聞いた話をローマンに漏らしたせいであり、本当の発見者はサイラス・フィスケ（１８９０－１９７８）とイェラプラガダ・サバロウ（１８９６－１９４８）」 だそうです（４，９）。理系の方の多くは学生時代にフィスケ・サバロウ法でリンを定量したと思います。丸山工作はフィスケとサバロウの実験ノートを調べて、彼らが１９２７年から１９２８年にかけて、ＡＴＰを発見していたことを確認したそうです（４）。

そして松田誠によると、ATP (アデノシン３リン酸) の分子構造を解明したのもローマンではなく、牧野堅（１９０７～１９９０、図６）だそうです（１０，１１）。これには私も全く知らなかった話で、仰天しました。牧野がどのような方法で解明したかも文献（１１）に詳しく記載してあります。牧野堅は実験を行った場所こそ大連という辺境の街の病院でしたが、論文はドイツ語で書いてドイツの雑誌に受理されているわけですから（１０）、もっと正当に評価されるべきだったと思います。

すでに核酸のところでも出ましたが、ＡＴＰの構造を再揭します（図７）。ＡＴＰは図のように高エネルギー結合を２ヶ所に持っており、加水分解されてＡＤＰあるいはＡＭＰに代謝されると、エネルギーを放出します。狭い場所に酸素原子が５個も存在して、電気的反発で非常に居心地が悪いのに、酸素を挟んで並ぶＰとＰが中間にある酸素のローンペアを綱引きしているので、いわゆる共鳴による安定化ができないため、非常に不安定な状態にあります。両側からバネで無理矢理圧縮されているような状態なので、加水分解で解放されると激しく振動し、温度を上昇させます（４）。

またＡＴＰは図８に示したように、共役反応によって、基質Ａをより自由エネルギーの高い活性化状態に担ぎ上げることができます。この状態でＢと反応が進行し、リン酸を放出して化合物Ａ－Ｂが生成します。この場合ＡとＢと酵素を単にまぜあわせても、ＡＴＰがなければＡ－Ｂという化合物はできません。ＡＴＰを使う共役反応で、生物は必要な物質を、高分子物質すら合成することができます。ＡＴＰはこのように生合成や発熱に使われるだけでなく、筋収縮や能動輸送など生物に特異な現象に幅広く関わっています。

１９３７年ハンス・クレブス（１９００～１９８１、図９）はハト胸筋のスライスにピルビン酸とオキザロ酢酸を加えるとクエン酸が生成されることを発見しました。その頃までにコハク酸からオキザロ酢酸への経路はセント・ジェルジによって、クエン酸からα－ケトグルタル酸への経路はカール・マルチウスとフランツ・クヌープによって明らかにされていたので、この両者をつなぐことができたことで、一気にクエン酸回路の完成に近づきました（４）。彼は天才的科学者でかつ医師でしたが、ユダヤ人であったためにドイツで働くことができず、英国に移住して研究を行いました。

クレブスの実験はあくまでも細胞にピルビン酸とオキザロ酢酸を加えると、途中の経路はブラックボックスで、結果的に細胞がクエン酸を生成するというもので、反応の実体は不明でした。このブラックボックスを解明したのがフリッツ・リップマン（１８９９～１９８６、図９）でした。リップマンもユダヤ人であり、ナチスの迫害を逃れて米国で研究を行いました。彼らに限らず、２０世紀における科学の重要な進展の大部分は、ナチスに追われたユダヤ人によって成し遂げられたように思います。

解糖によって生成されたピルビン酸が、どのようにしてクエン酸回路に投入されるかという問題はリップマンによって解明されました。キーとなる因子はリップマンが発見したコエンザイムＡ（ＣｏＡ あるいは ＨＳＣｏＡ などとも表記します）でした（図１０）。まずピルビン酸はコエンザイムＡと反応してコエンザイムをアセチル化し、アセチルＣｏＡを生成します（図１０、図１１）。この反応で二酸化炭素とプロトンが発生し、二酸化炭素は肺から外界に排出されます。プロトンはミトコンドリアに蓄積されます。

次にアセチルＣｏＡはオキザロ酢酸とアセチル基を連結させてクエン酸とＨＳＣｏＡを生成します。クエン酸はクエン酸回路に投入され、ＨＳＣｏＡは再利用されるということになります。クレブスとリップマンはクエン酸回路の解明によって、１９５３年にノーベル医学・生理学賞を受賞しています（１２－１４）。

なぜコエンザイムＡのような非常に複雑な分子が、酸素存在下で生物が大発展するためのキーファクターになったのか、それは謎です。

参照

１）J.J.Beringer, 　John Mayow: Chemist and Physician.,  Journal of the Royal Institution of Cornwall. Royal Institution of Cornwall. vol.IX, pp.319-324
https://books.google.co.jp/books?id=10MBAAAAYAAJ&pg=PA319&redir_esc=y&hl=ja#v=onepage&q&f=false

２）https://archive.org/details/elementschemist00kerrgoog

３）近代化学の父：ラボアジェ
https://istudy.konan.ed.jp/renandi/materialcontents/107932/101920/2016PreLabo09.pdf

４）杉晴夫著　「栄養学を拓いた巨人たち」　講談社ブルーバックスＢ－１８１１　（２０１３）

５）F. G. Young, Claude Bernard And The Discovery Of Glycogen: A Century Of Retrospect., The British Medical Journal, Vol. 1, pp. 1431-1437  (1957)
https://www.jstor.org/stable/25382898?seq=1#page_scan_tab_contents

６）松岡正剛の千夜千冊
https://1000ya.isis.ne.jp/0175.html

７）クロード・ベルナール著、三浦岱栄訳　「実験医学序説」　岩波文庫　青９１６－１　（１９７０）

８）木村光、オットー・マイヤーホッフのヒトラーとナチスからの逃脱－ピレネー越えの真相　化学と生物　ｖｏｌ． ５３ （１１）,　ｐｐ.７９２－７９６ （２０１５）
https://katosei.jsbba.or.jp/view_html.php?aid=478

９）Fiske CH, Subbarow Y.,  Phosphorus compounds of muscle and liver. Science 1929, vo. 70, pp. 381-382 (1929)

１０）Makino K., Ueber die Konstitution der Adenosin-Triphosphorsaeure. Biochem Z. vol. 278, pp. 161-163 (1935)

１１）松田誠　牧野堅によるＡＴＰ構造解明　慈恵医大誌　vol. 125, pp. 239-248 (2010)
http://ir.jikei.ac.jp/bitstream/10328/6505/1/125-6-239.pdf

１２）Award Ceremony Speech.
https://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1953/press.html

１３）Hans Krebs: Nobel lecture, The citric acid cycle.
https://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1953/krebs-lecture.pdf

１４）Marc A. Shampo and Robert A. Kyle., Fritz Lipmann—Nobel Prize in Discovery of Coenzyme A. Mayo Clinic Proceedings, Volume 75, Issue         1,  Page 30
http://www.mayoclinicproceedings.org/article/S0025-6196(11)64252-3/pdf