やぶにらみ生物論１２７： ＧＡＢＡ その１

  神経伝達物質をざっと概観しようとしてきましたが、これまでにアセチルコリン、各種モノアミン類を取り上げてきました。今回からアミノ酸関連因子に進みます。図１にそのなかでも重要な２つの要素が出てきますが、まず右側の γ－アミノ酪酸（ＧＡＢＡ＝γ-amino butyric acid）から見ていきましょう。

ＧＡＢＡはグルタミン酸からグルタミン酸脱炭酸酵素（ＧＡＤ＝L-glutamic acid decarboxylase)によって産生されます。材料のグルタミン酸は細胞外からグルタミン酸トランスポーターを用いて取り込む場合と、細胞内でＴＣＡサイクルの α－ケトグルタル酸から合成する場合があります（１）。

ＧＡＤにはふたつのアイソフォーム（ＧＡＤ６５，ＧＡＤ６７）があり、ＧＡＤ６７が細胞質全体に存在するのに対してＧＡＤ６５は神経終末部に豊富に存在することから、ＧＡＤ６５が抑制性シナプス伝達を担うＧＡＢＡ合成に主として関与すると考えられています（１）。

タンパク質の構成要素となるアミノ酸はαの位置にアミノ基がありますが、ＧＡＢＡの場合図１のようにγの位置にアミノ基があります。したがってＧＡＢＡはタンパク質の構成要素としてのアミノ酸ではありません。

ＧＡＢＡの発見者はアッカーマンという人で、細菌による腐敗の結果生ずるものと報告されているそうです（２、３）。現在も発行されている Zeitshrift fur Physikalische Chemie のホームページを見てみましたが、アッカーマンの論文の紙面は提供されていませんでした。

その後ＧＡＢＡはカビや植物からも抽出されましたが、ロバーツ（図２）はマウスの脳にＧＡＢＡが存在することを発見しました（４、５）。ロバーツは自伝を書いていますので（３）、少し彼の人生をたどってみましょう。

ユージン・ロバーツは１９２０年に黒海沿岸で生まれましたが、１９１７年にロシア革命が勃発し、いわゆるブルジョアジーだった彼の一家は１９２２年にラトヴィア経由で、親戚を頼って米国のデトロイトに移住しました。彼は高校時代にアンドレという女性教師に実験室を自由に使わせてもらってゾウリムシの研究を行い、それが生物学へ傾倒するきっかけとなったそうです。高校教師も科学の進歩に関係がないわけではありません。

彼はウェイン州立大学を卒業後、ミシガン大学で学位をとりましたが、太平洋戦争中ということもあって、学位取得前からニューヨークのロチェスター大学でマンハッタンプロジェクトに参加し、ウラニウムのダストをどのくらい吸い込むと危険かという研究に携わりました。

戦後の１９４９年になって、彼は２次元ペーパークロマトグラフィーの技術を使って、脳に大量のＧＡＢＡが存在することを発見しました。これは「正常細胞とがん細胞で、フリーのアミノ酸の含量に差があるかどうか調べる」という目的の研究の副産物として発見されました。「目的指向的研究をやれ」とよく役人やその尻馬に乗る人々が言うわけですが、実際には所期の目的とは「はずれた」副産物の方が重要だったということはよくあることです。テクノロジーの進化には目的指向をはっきりさせることが大事かもしれませんが、サイエンスにとって多くの場合、当初の研究目的はきっかけに過ぎません。

脳にＧＡＢＡが存在するという研究結果は、１９５０年に共同研究者のサム・フランケルと共に発表し論文にもまとめました。同じ年に Udenfriend（６）と、Awaparaのグループ（７）も同様な結果を発表していますが、前者はロバーツからサンプルの提供を受けて、ラジオアイソトープを使った別法で成分を確認したもの（ロバーツは Fed. Proc.の中でこのことに言及しています 参照５）。後者はプライオリティーの点でやや遅れをとったとみなされています（８）。ただアワパラ側がどう考えていたのかについては情報が得られなかったので、本当のところ真実は藪の中です。

発表後ロバーツはアッカーマンから祝福の手紙を受け取ったそうです（３）。アッカーマンがＧＡＢＡを発見してから４０年が経過しているので、もうリタイアしていたと思いますが、心温まるエピソードだと思います。その後ロバーツのグループは、ＧＡＢＡがほ乳類の脳における主要な抑制性神経伝達因子であることを示すうえで大きな貢献をしました。

現在では脳のニューロンのうち約３０％がＧＡＢＡ性（ギャバージック）の抑制性ニューロンであることが知られていますが（９）、そもそも抑制性ニューロンなどというものがあることは誰が発見したのでしょうか？

最初にこのことに気づいたのは、ロシアの「生理学および科学的心理学の父」といわれるセチェノフでした。彼はカエルの脊髄反射は脳を除去することによって促進され、脳を刺激することによって抑制されることを報告しました（１０、１１、図３）。まだ１９世紀のなかばの頃です。脳を科学的に考えるにはあまりに時期が早かったため、唯物論を広めキリスト者としてのモラルを低下させたかどで、迫害されたこともあったようです（１２）。条件反射などの研究で１９０４年にノーベル生理学医学賞を受賞したパヴロフも、もともとの定義に反することであっても、後に反射に脳がかかわっていることを認めて報告しています（１３）。

英国の生理学者シェリントン（図３）は膝蓋反射のように感覚神経と運動神経が単純に反応するような反射もあるが、ひっかき反射（１４）などでは、感覚神経・運動神経以外の神経、すなわち複数のシナプスがかかわっていることを示しました。すなわち犬の肩をこすると、こすった側の後ろ足の屈筋が刺激されますが、同時に伸筋は抑制されるのです（１５）。このことは抑制性の神経系の存在を強く示唆するものです。これらの業績によって、シェリントンは１９３２年にノーベル生理学医学賞を受賞しました。

その後グルタミン脱炭酸酵素（ＧＡＤ＝L-glutamic acid decarboxylase)の抗体を用いて、ＧＡＢＡを産生する細胞を同定する試みは、ロバーツを含む多くの研究者によって、徹底的に行われました（１６、１７）。

文献（１７）によると、ＧＡＤが局在する部域は、cerebellum（小脳）, spinal cord（脊髄）, retina（網膜）, habenula（手綱）, olfactory bulb（嗅球）, substantia nigra（黒質）, corpus striatum（線状体）, red nucleus（赤核）, arcuate nucleus（視床下部弓状神経核）,lateral cervical nucleus, tuberomammillary nucleus（結節乳頭体神経核）, cochlear nucleus（蝸牛神経核）, vestibular nuclei（前庭神経核）, dorsal column nuclei（後索神経核）, nucleus reticularis thalami（視床網様体神経核）, globus pallidus（淡蒼球） and nucleus entopeduncularis（脚内神経核）, visual cortex（視覚野）, dentate gyrus（歯状回）, superior colliculus（上丘）, sensory-motor cortex（感覚運動皮質）, septal area（中隔野）, hypothalamus（視床下部）, hippocampus（海馬）, geniculate complex（膝状複合体）, and nucleus tractus solitarii（孤束神経核）と広汎にわたっています。

それぞれの部域については、図４、図５に赤で示しました。

これらの多くは後に学んでいくことになると思いますが、とりあえず大脳基底核周辺における GABAergic な伝達系がウィキペディアに出ていたので、図６にコピペしました（１８）。GABAergic なシナプス前細胞は、シナプス後細胞を過分極させて脱分極を抑制する方向に作用します。線状体から淡蒼球や黒質に情報が投射していることが示されています。抑制性の神経細胞は、自身が抑制性の神経細胞とシナプスをつくると、シナプス後細胞による抑制作用を抑制することになり、結果的に促進細胞に変身することもあり得ます。

参照

１）脳科学辞典　ＧＡＢＡ
https://bsd.neuroinf.jp/wiki/GABA

２）Ackermann, D. Uber ein neues, auf bakteriellem Wege gewinnbares Aporrhegma. Z. Physiol. Chem. vol.69, pp.273-281. (1910)

３）Eugene Roberts (autobiography), in "The History of Neuroscience in Autobiography" VOLUME 2, Ed.Larry R. Squire, Academic Press (1998)
file:///C:/Users/User/Desktop/GABA/Eugene%20Roberts.pdf

４）Roberts, E. and Frankel, S. γ-Aminobutyric acid in brain: Its formation from glutamic acid. Journal of Biological Chemistry vol.187: pp.55-63,(1950)
http://www.scholarpedia.org/w/images/2/29/GABA_abstract.jpg

６）Udenfriend, S. Identification of gamma-aminobutyric acid in brain by the isotope derivative method. Journal of Biological Chemistry vol.187: pp.65-69 (1950)

７）Awapara, J., Landua, A.J., Fuerst, R., and Seale, B. Free gamma-aminobutyric acid in brain. Journal of Biological Chemistry vol.187:pp.35-39,(1950)

８）Eugene Roberts,　Gamma-aminobutyric acid., Scholarpedia, vol.2(10), p.3356.(2007)
http://www.scholarpedia.org/article/Gamma-aminobutyric_acid

９）小幡邦彦　ＧＡＢＡのはたらき、Riken BSI news vol.37, １０月号 (2007)
http://bsi.riken.jp/bsi-news/bsinews37/no37/special.html

１０）"Refleksy golovnogo mozga." Meditsinsky vestnik 47-48 ("Reflexes of the brain", in Russian) (1863)

１１）K.Obata,　Synaptic inhibition and γ-aminobutyric acid in mammalian central nervous system. Proc.JPN.Acad., Ser.B89, No.4, pp.139-156 (2013)
https://www.jstage.jst.go.jp/article/pjab/89/4/89_PJA8904B-03/_article/-char/ja

１２）https://en.wikipedia.org/wiki/Ivan_Sechenov

１３）Pavlov,I.P., Conditioned Reflexes (translated by Anrep,G.V.). Dover Publications, Mineola, NY, pp.1-430 (1927)

１４）Scratch reflex of dog
https://www.youtube.com/watch?v=VzCwXaU_tJ0

１５）Sherrington, C.S., The Integrative Action of the Nervous System. Yale Univ. Press, New Haven, CT, pp.1-413 (1906)

１６）E. Roberts amd Kinya Kuriyama, Biochemical-physiological correlations in studies of the γ-aminobutyric acid system. Brain Res., vol.8, pp.1-35 (1968)
file:///C:/Users/User/AppData/Local/Microsoft/Windows/INetCache/IE/C8FQEO1U/first-page-pdf.pdf

１７）１７）Elling Kvamme, Glutamine and Glutamate Mammals. Vol.1, CRC Press (1988)
VI Identification and localization of L-glutamate decarboxylase.
こちら

１８）https://en.wikipedia.org/wiki/Striatum